Pobieranie prezentacji. Proszę czekać

Pobieranie prezentacji. Proszę czekać

WYKŁAD 2 cz. 4.

Podobne prezentacje


Prezentacja na temat: "WYKŁAD 2 cz. 4."— Zapis prezentacji:

1 WYKŁAD 2 cz. 4

2 CYKLINA : Cdk pRB : E2F ppRB E2F ATP pRB : E2F ADP FAZA G1 FAZA S CYKLINACdk FAZA G1FAZA S NAPRAWA LUB APOPTOZA

3 p53 p21 WAF1/CIP CYKLINA : Cdk pRB : E2F ppRB E2F ATP pRB : E2F ADP FAZA G1 FAZA S CYKLINACdk FAZA G1FAZA S NAPRAWA LUB APOPTOZA Uszkodzenie BŁĄD MDM4 MDM2 Stabilizacja p53

4 CYKLINA : Cdk pRB : E2F ppRB E2F ATP pRB : E2F ADP FAZA G1 FAZA S CYKLINACdk FAZA G1FAZA S NAPRAWA LUB APOPTOZA Gdy brak aktywności p53

5 KlasycznyNeuroblastyczny Desmoplastyczny KLASYFIKACJA RDZENIAKÓW MÓŻDŻKU Kryńska B., et al. (1999) PNAS, 96:

6 IMMUNOHISTOCHEMICNE WYKRYWANIE ANTYGENU T VIRUSA JCV (JCV T-Ag) W RDZENIAKACH MÓŻDŻKU Powiększenie x400 (A & B); x200 (C); x1000 (wstawki) Groty wskazują komórki dzielące się Strzałki wskazują komórki z JCV T-Ag Kryńska B., et al. (1999) PNAS, 96:

7 IMMUNOHISTOCHEMICZNA ANALZA MARKERÓW RDZENIAKA MÓŻDŻKU GFAP Powiększenia x200 (D) & x400 (E i F). Synaptofizyna tubulina klasa III Kryńska B., et al. (1999) PNAS, 96:

8 VP T 173 bp ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 212 bp ( ) ( ) ( ) 220 bp PCR primers Amplified DNA Probe JCV (Mad-1) 5130 bp Region kontroli 5130/ Agno VP3 VP2 t Kryńska B., et al. (1999) PNAS, 96: GENOM WIRUSA JCV

9 WYKRYWANIE METODĄ PCR DNA JCV W RDZENIAKACH MÓŻDŻKU Obszar kodujący wczesne geny (N-koniec antygenu T) Obszar kodujący wczesne geny, (C-koniec antygenu T) Obszar kodujący późne geny (białko kapsydu VP1) Kryńska B., et al. (1999) PNAS, 96:

10 Kryńska B., et al. (1997) JCB, 67: KOMPLEKSY ANTYGENU T & p53

11 Kryńska B., et al. (1997) JCB, 67: EKSPRESJA p21 W OBECNOŚCI ANTYGENU T

12 Kryńska B., et al. (1997) JCB, 67: EKSPRESJA CYKLIN E, A, & KINAZY CDK2 W OBECNOŚCI ANTYGENU T

13 Kryńska B., et al. (1997) JCB, 67: EKSPRESJA CYKLINY D ORAZ KINAZ CDK4, & CDK6 W OBECNOŚCI ANTYGENU T

14 BLOKOWANIE APOPTOZY PRZEZ p300 WYMAGA OBECNOŚCI CYKLINY D1

15 KOMPLEKSY ANTYGENU T & pRB Kryńska B., et al. (1997) JCB, 67:223-30

16 EKSPRESJA E2F & PCNA W OBECNOŚCI ANTYGENU T Kryńska B., et al. (1997) JCB, 67: PCNA – Proliferation Cells Nuclear Antigen – Antygen Proliferujących Komórrek

17 Rizzo P., et al. (2001) Cancer Biol, 21:63-71 GENOM SV40

18 PCR Immuno cytoSV40JCV WiekchemiaT-AgT-AgT-Ag No.PłećlataDiagnozaT-Ag(C-koniec)(N-term)(C-term)VP-1 1M5ClassicN/A-+-+ 2M7DesmoplasticN/A++++ 3M6DesmoplasticN/A-+-+ 4M4ClassicN/A-+++ 5M5DesmoplasticN/A-+-+ 6F11ClassicN/A++-+ 7M2NeuroblasticN/A-+++ 8M1.5Desmoplastic F4Desmoplastic M15Desmoplastic F42Desmoplastic M7Classic F18Neuroblastic F8Desmoplastic M7Classic M9Classic F3Desmoplastic F9Desmoplastic M5Neuroblastic F2Classic MNewbornClassic M12Classic M5Neuroblastic--+++ Kryńska B., et al. (1999) PNAS, 96: ANTYGENY T SV40 & JCV WYKRYTO U OKOŁO 22% PRZYPADKÓW

19 Tabela 2. Wykrywanie DNA SV40 w guzach u ludzi metodą PCR Rodzaj guza PublikacjaZestaw starterów Pozytywny % (wielkość produktu p.z.)wynik PleuralGriffiths et al. 36 SV.for3/SV.rev (105)26/ mesotheliomaSV.for2/SV.rev (574)3/26 12 De Luca et al. 27SV.for3/SV.rev (105)30/35 86 Pass et al. 30SV.for3/SV.rev (105)30/42 71 Mayall et al. 41SV.for3/SV.rev (105)5/7 71 Shivapurkar et al. 44SV.for3/SV.rev (105)61/93 66 Carbone et al. 16SV.for3/SV.rev (105)29/48 60 PYV.for/PYV.rev (172)36/48 75 Procopio et al. 54PYV.for/PYV.rev (172)50/83 60 Ramael et al. 103PYV.for/PYV.rev (172)14/25 56 SV.for2/SV.rev (574) Cristaudo et al. 48RA3/RA4 (482)10/18 56 Galateau-Salle PYV.for/PYV.rev (172)10/21 48 et al. 33

20 Tabela 2. Wykrywanie DNA SV40 w guzach u ludzi metodą PCR (c.d. 1) Rodzaj guza PublikacjaZestaw starterów Pozytywny % (wielkość produktu p.z.)wynik Pleural Dhaene et al. 40SV.for3/SV.rev (105)13/28 46 mesothelioma Pepper et al. 18SV.for3/SV.rev (105)4/9 44 PYV.for/SV.rev (172)6/9 67 Strizzi et al. 47PYV.for/PYV.rev (172)9/23 39 Mutti et al. 100SV.for3/SV.rev (105)8/25 32 Strickler and SV.for3/SV.rev (105)0/50 0 Goedert 23 Mulaterro et al. 63PYV.for/SV.rev (172)0/12 0 Hirvonen et al. 37SV2for/SV.rev (576)0/49 0 Emri et al. 51SV.for2/SV.rev (574)0/29 0

21 Tabela 2. Wykrywanie DNA SV40 w guzach u ludzi metodą PCR (c.d. 2) Rodzaj guza PublikacjaZestaw starterów Pozytywny % (wielkość produktu p.z.)wynik Peritoneal Shivapurkar et al. 44SV.for3/SV.rev (105) 6/11 55 mesotheliomas Brochopulmonary Galateau-Salle PYV.for/PYV.rev (172)18/63 29 carcinomas et al. 33 Shivapurkar et al. 44SV.for3/SV.rev (105)0/20 0 Procopio et al. 34PYV.for/SV.rev (172)0/18 0 Carbone et al. 16SV.for3/SV.rev (105)0/13 0 Pepper et al. 18SV.for3/SV.rev (105)0/9 0 SV.for3/SV.rev (105) Choroid plexus Martini et al. 20PYV.for/PYV.rev (172)5/6 83 tumours Bergsagel et al. 14SV.for3/SV.rev (105)10/20 50 Huang et al. 39SVTAGP1/SVTAGP3 (158)6/16 38 Lednicky et al. 106LA1/LA2 (294)10/13 77 Bergsagel et al. 14SV.for3/SV.rev (105)10/20 50 Ependymomas Bergsagel et al. 14SV.for3/SV.rev (105)10/11 91 Lednicky et al. 106LA1/LA2 (294)3/3 100 Martini et al. 20PYV.for/PYV.rev (172)8/11 73

22 Tabela 2. Wykrywanie DNA SV40 w guzach u ludzi metodą PCR (c.d. 3) Rodzaj guza PublikacjaZestaw starterów Pozytywny % (wielkość produktu p.z.)wynik Ependymomas Weggen et al. 53SV.for3/SV.rev (105)1/25 4 Bersagel et al. 14SV.for3/SV.rev (105)7/11 64 Medulloblastomas Lednicky et al. 106LA1/LA2 (294)2/6 33 Huang et al. 39SVTAGP1/SVTAGP3 (158)5/17 29 Weggen et al. 53SV.for3/SV.rev (105)2/116 2 Krynska et al. 102SV.for3/SV.rev (105)5/23 22 Astrocytomas Martini et al. 20PYV.for/PYV.rev (172)8/17 17 Huang et al. 39SVTAGP1/SVTAGP3 (158)22/50 44 Meningiomas Martini et al. 20PYV.for/PYV.rev (172)1/7 14 Weggen et al. 53SV.for3/SV.rev (105)1/131 1 Oligodendroglioma Huang et al. 39 SVTAGP1/SVTAGP3 (158) 3/12 25 Martini et al. 20 PYV.for/PYV.rev (172) 0/9 0 Glioblastomas Martini et al. 52 PYV.for/PYV.rev (172) 10/30 33

23 Tabela 2. Wykrywanie DNA SV40 w guzach u ludzi metodą PCR (c.d. 4) Rodzaj guza PublikacjaZestaw starterów Pozytywny % (wielkość produktu p.z.)wynik Osteosarcomas Lednicky et al.15 SV.for3/SV.rev (105) 5/10 50 TA1/TA2 (441) 5/10 50 Yamamoto et al.50 R1/R2 (315) 21/54 39 Carbone et al.17 SV.for2/SV.rev (574) 40/ Mendoza et al.32 SV.for3/SV.rev (105) 9/35 26 Other bone Carbone et al.17 SV.for2/SV.rev (574) 14/34 32 TumoursGamberi et al.46 PYV.for/SV.rev (172) 30/ SV.for2/SV.rev (574) Papillary thyroid Pacini et al.31 SV.for3/SV.rev (105) 3/69 4 carcinomas (PTC) LA1/LA2 (294) Non-PTC thyroid Pacini et al.31 SV.for3/SV.rev (105) 0/9 0 tumours LA1/LA2 (294) Non-Hodgkins Rizzo et al.38 V5/SV6 (172) 3/29 10 lymphomas Martini et al.52 PYV.for/PYV.rev (172) 13/95 14

24 Tabela 2. Wykrywanie DNA SV40 w guzach u ludzi metodą PCR (c.d. 5) Rodzaj guza PublikacjaZestaw starterów Pozytywny % (wielkość produktu p.z.)wynik Hodgkins Martini et al.52 PYV.for/PYV.rev(172) 8/55 15 lymphomas AIDS lymphoma Rizzo et al.38 SV5/SV6 (172) 2/5 40 Prostatic tumours Radu et al.68 SV.for3/SV.rev (105) 4/33 12

25 2948–2953, PNAS, March 5, 2002, vol. 99, no. 5 Targeted point mutations of p53 lead to dominant-negative inhibition of wild-type p53 function Celowana mutacja punktowa w genie p53 powoduje Dominujące-ujemne hamowanie funkcji dzikiego allelu p53 Annemieke de Vries*, Elsa R. Flores*, Barbara Miranda*, Harn-Mei Hsieh*, Conny Th. M. van Oostrom, Julien Sage*, and Tyler Jacks* Howard Hughes Medical Institute, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, MA and National Institute of Public Health, Laboratory of Health Effects Research, 3720 BA Bilthoven, The Netherlands

26 Mutacja Rekombinacja homologiczna MUTACJA POJEDYNCZEO ALLELU p53 de Vries A. et al. (2002) PNAS, 99:

27 Udział mutacji jednego allelu p53 na przeżywalność komórek zarodkowych NORMALNY/ DZIKI GEN p53 JEDEN ALLEL p53 NIENAKTYWNY HETEROZYGOTYCZNA MUTACJA p53 de Vries A. et al. (2002) PNAS, 99: Obydwa nie aktywne allele p53

28 Apotoza zalezna odp53Apoptoza nie zalezna odp53 Udział mutacji jednego allelu p53 na przeżywalność komórek grasicy de Vries A. et al. (2002) PNAS, 99:

29 1–5, Nature Genetics, FEBRUARY 11, 2002, online publication BRCA1 regulates the G2/M checkpoint by activating Chk1 kinase upon DNA damage BRCA1 reguluje punkt kontrolny cyklu komórkowego G2/M aktywując kinazę Chk1 w przypadku uszkodzenia DNA Ronit I. Yarden 1, Sherly Prado-Reoyo 1, Magda Sgagias 2, Kenneth H. Cowan 2 & Lowrence C. Brody 1 1 Genome Technology Branch, National Human Genome Research Institute, National Institutes of Health, Bethesda, MD 2 Eppley Institute of Cancer Research, University of Nebraska Medical Center, NA

30 Uszkodzenie DNA ATM/ATR (ataxia telangiectasia mutated/ATM and Rad3-related) Chk1 – Kinaza regulatorowa hCds1/Chk2 ? Cdc25CWee1 Kinaza Cdc2/cyklina B G2M ATM, ATR i hCds1/Chk2 to białka odpowiedzi na uszkodzenie DNA zmieniające fosforylację BRCA BRCA1 ARESZT w

31 Uszkodzenie DNA ATM/ATR BRCA1 Chk1 – Kinaza regulatorowa hCds1/Chk2 ? Cdc25CWee1 Kinaza Cdc2/cyklina B G2M ATM, ATR i hCds1/Chk2 to białka odpowiedzi na uszkodzenie DNA zmieniające fosforylację BRCA NIEKONTROLOWANA PROLIFERACJA BRAK AKTYWNOŚCI BRCA1

32

33 Niekontrolowane podziały Wczesne zmiany Późne zmiany NOWOTWÓR Nowotwór In Situ Postać złośliwa (Inwazyjna) Normalny nabłonek Przednowotworowe Metastaza Postępująca kumulacja uszkodzeń genów TRANSFORMACJA NOWOTWOROWA UTRATA KONTROLI SPOŁECZNEJ (APOPTOZA)

34 DZIĘKUJĘ ZA UWAGĘ K O N I E C NASTĘPNY WYKŁAD NA TEMAT NOWE TECHNOLOGIE BIOLOGII MOLEKULARNEJ W DIAGNOSTYCE MEDYCZNEJ


Pobierz ppt "WYKŁAD 2 cz. 4."

Podobne prezentacje


Reklamy Google