– perspektywy leczenia za pomocą przeciwciał monoklonalnych Sepsa – perspektywy leczenia za pomocą przeciwciał monoklonalnych

Barwienie bakterii gramdodatnich i gramujemnych. Gram + Staphylococcus Gram – Escherichia coli http://www.bact.wisc.edu/MicrotextBook/BacterialStructure/CellWall.html

http://www.ami.dk/upload/udgivelser/lam_phd.pdf

Przebieg ogólnego stanu zakażenia Adhezja i migracja kompleksu śródbłonkowo-leukocytarnego Odpowiedź śródbłonka i miejscowych tkanek Tlenek azotu i jego potencjalny wpływ na oddychanie komórkowe w przebiegu sepsy Zaburzenia funkcji narządów: Układ krążenia (zaburzenia regulacji naczynio-ruchowej, zaburzenia funkcji serca, zaburzenia hematologiczne), Zaburzenia czynności wątroby, Zaburzenia czynności płuc, Zaburzenia czynności nerek, Zaburzenia metaboliczne (zaburzenia przemiany glukozy, zaburzenia przemiany białkowej)

Czynniki patogenne wywołujące sepsę. Odpowiedź wrodzona odgrywa kluczową rolę w zasygnalizowaniu obecności zakażenia i zainicjowaniu reakcji immunozapalnej. Wrodzona odpowiedź na zakażenie Gram—ujemne (60% przypadków septycznych) jest wzbudzana przez endotoksynę (LPS). LPS w postaci kompleksu ze swoistym białkiem osocza (LBP) ulega związaniu z receptorem błonowym (CD14) na komórkach efektorowych (np. makrofagi). Inicjuje to śródkomórkową transdukcję sygnalną za pośrednictwem swoistego mechanizmu receptorowego (TLR, toll-like receptor). Odpowiedź na zakażenia Gram-dodatnie (40% przypadków) rozwija się wtórnie w stosunku do wytwarzania swoistej endotoksyny lub — częściej — wskutek oddzielania się fragmentów błony komórkowej.

http://www.cat.cc.md.us/courses/bio141/lecguide/unit1/bacpath/shock/lpsharm.html

http://www.ami.dk/upload/udgivelser/lam_phd.pdf

IL-1Ra – antagonista receptora IL-1, regulacja aktywności receptora MIP-1a i MIP-1b (chemokiny CC) (macrophage inflammatory protein) – chemotaktyczne działanie na monocyty, limfocyty T, B i NK, eozynofile, komórki dendrytyczne i tuczne, modyfikacja proliferacji macierzystych komórek krwiotwórczych (MIP-1a hamuje, a MIP-1b wzmaga) IL-8 – chemotaksja neutrofili i aktywacja ich właściwości bakteriobójczych IL-1 – silnym induktorem produkcji jest LPS, IL-1 wzmaga wydzielanie IL-2, indukuje produkcję Ig, powoduje gorączkę i senność IL-1Ra – antagonista receptora IL-1, regulacja aktywności receptora IkB – inhibitor występujący w cytoplazmie w kompleksie z NFkB, po fosforylacji inhibitora przez specyficzną kinazę czynnik NFkB ulega uwolnieniu IL-6 – produkowana głównie przez monocyty i makrofagi, wielokierunkowe działanie, np.: indukuje limfocyty B do różnicowania się w kierunku komórek uwalniających Ig różnych klas, aktywuje limfocyty T, pobudza krwiotworzenie, wywołuje gorączkę

Forma sCD14 nie posiada kotwicy lipidowej - glicerofosfatydyloinozytolu

Ilościowe oznaczenie wiązania LPS do komórek epitelialnych

Cytokiny prozapalne

Czynniki antyzapalne (białe kółka – po zastosowaniu mAb, czarne kółka – kontrola bez przeciwciał)

Poziom wysycenia receptorów na granulocytach i monocytach

Przeciwciała monoklonalne Firma Wskazania Faza badań IC14 ICOS (Bothell, WA) Sepsa Faza II Anti-tumor necrosis factor Bayer corporation, Pharmaceutical division, Biological Products (Berkeley, CA), Chiron (Emeryville, CA) Faza III http://imgt.cines.fr/textes/IMGTrepertoire/GenesClinical/monoclonalantibodies/other.html

Potencjalne metody walki z sepsą: Terapia antybiotykowa. Przeciwciała monoklonalne przeciwko LPS. Terapia genowa. Mechaniczne usuwanie. Inhibicja drugich mediatorów. Blokowanie kaskady koagulacyjnej. Inhibitory syntazy NO. Przeciwciała monoklonalne przeciwko cząsteczkom adhezyjnym.

PCR with universal primers X and Y 1B 2B Primer X Target specific Stuffer sequence Primer Y binding site sequences binding site Probe design Synthetic oligonucleotide M13 derived oligonucleotide 1A 1B 2A 2B Target 1 Multiplex hybridisation and ligation No ligation of mismatched probes Target 2 www.mlpa.com PCR with universal primers X and Y