Lekowrażliwość szczepów Proteus mirabilis wytwarzających beta-laktamazy o rozszerzonym spektrum substratowym Zakład Diagnostyki Mikrobiologicznej i Immunologii Infekcyjnej Uniwersytet Medyczny w Białymstoku Anna Michalska, Paweł Sacha, Dominika Ojdana, Anna Sieńko, Elżbieta Tryniszewska

Proteus mirabilis Gram-ujemna pałeczka Enterobacteriaceae posiada wiele czynników wirulencji: ureaza, proteazy IgA, fimbrie, rzęski, adhezyny, LPS częsta przyczyna skomplikowanych zakażeń układu moczowego związanych ze stosowaniem cewnika (szpitale, zakłady opieki długoterminowej) naturalna oporność na nitrofurantoinę i tetracykliny http://cdnimg.visualizeus.com/thumbs/92/b5/microbiology,pathology-92b585cdf77243969a91ecfdf22f7255_h.jpg

Beta-laktamazy o rozszerzonym spektrum substratowym (ESBL) Zidentyfikowane po raz pierwszy w 1983 roku Ponad 200 wariantów w obrębie 11 rodzin (CTX-M, TEM, SHV) Enzymy hydrolizujące: penicyliny cefalosporyny – cefotaksym, ceftazydym, ceftriakson monobaktamy – aztreonam Aktywność hamowana in vitro przez kwas klawulanowy, sulbaktam i tazobaktam Enterobacteriaceae, P. aerugniosa, A. baumannii Związane z ruchomymi elementami genetycznymi! http://www.chromagar.com/images_produit/000031-237x237.jpg

Cel pracy Ocena lekowrażliwości 100 ESBL-dodatnich szczepów Proteus mirabilis wyizolowanych z następujących materiałów klinicznych: mocz (n=54) wymaz z rany (n=23) wydzielina z oskrzeli (n=11) kał (n=7) krew (n=4) http://www.sciencephoto.com/image/11119/350wm/B2200487-TEM_of_Proteus_mirabilis_bacterium-SPL.jpg

Obiekt badań Proteus mirabilis (Enterobacteriaceae) 398 szczepów wyizolowanych z materiałów klinicznych USK i UDSK od października 2012 do stycznia 2014 roku 100 szczepów podejrzanych o wytwarzanie ESBL (MIC CTX i CTZ >1 mg/L) https://microbewiki.kenyon.edu/images/4/44/Noodlymirabilis.jpg

Metody identyfikacja i wstępne badanie lekowrażliwości: VITEK 2 System (bioMérieux, Marcy l’Etoile, Francja); karty AST-N60, AST-N93 interpretacja zgodnie z kryteriami Europejskiego Komitetu d/s Oznaczania Lekowrażliwości  (EUCAST) http://www.biomerieux.pl/upload/Vitek2_detoure35.jpg

Wykrywanie mechanizmu ESBL Test synergizmu dwóch krążków (DDST): 20/10 μg amoksycylina/kwas klawulanowy 30 μg cefotaksym 30 μg cefepim agar Mueller-Hinton II kontrola negatywna: E. coli ATCC 25922 CTX 30 AMC 20/10 FEP 30

Wykrywanie mechanizmu ESBL Szczep ESBL-dodatni Szczep ESBL-ujemny CTX 30 AMC 20/10 FEP 30 CTX 30 AMC 20/10 FEP 30

Określenie parametru MIC E-testy (bioMérieux): ceftazydym TZ (256 μg), cefepim PM (32 μg), meropenem MP (32 μg), amikacyna AK (256 μg), ciprofloksacyna CI (32 μg) podłoże Mueller Hinton II zawiesina o gęstości 0.5 w skali McFarlanda inkubacja w 35°C przez 18 h http://www.biomerieux-usa.com/upload/Etest_Single_Packs2.jp-1.png

Wyniki AMP AMC CTZ MIC50 mg/L %R 32 100 16 89 92 CEP MIC50 mg/L %R 8 81 MEM AK CIP MIC50 mg/L %R 0.047 8 97 >32 100 AMP – ampicylina; AMC – amoksycylina/kwas klawulanowy; CTZ – ceftazydym; CEP – cefepim; MEM – meropenem; AK – amikacyna; CIP - ciprofloksacyna

Wyniki Wiek pacjentów: średnia 68.89; SD 18.45; min 2 lata, max 91 lat Płeć pacjentów: 64.0% mężczyzn; 36.0% kobiet Oddziały szpitalne: OIT 31.0%, Neurologia 22.0%, Urologia 19.0%, Reumatologia 12.0%, Chirurgia ogólna 8.0% , SOR 8.0% Materiały: mocz 54.0%, wymaz z rany 23.0%, wydzielina z oskrzeli 11.0%, kał 7.0%, krew 4.0%

Wnioski Duże rozpowszechnienie ESBL-dodatnich szczepów Proteus mirabilis w środowisku szpitala USK (100/398; 25.13%) Szczepy ESBL-dodatnie o wysokim poziomie oporności na antybiotyki beta-laktamowe Współistniejąca oporność na aminoglikozydy i fluorochinolony W większości przypadków karbapenemy jako jedyne antybiotyki aktywne wobec ESBL-dodatnich szczepów Proteus mirabilis

Dziękuję za uwagę