Bank Komórek Eukariotycznych Transfer Technologii do Centrum BioMoBiL 25-29 / 10 / 2004 Konrad Kleszczyński Jolanta Grzenkowicz – Wydra.

Prezentacja na temat: "Bank Komórek Eukariotycznych Transfer Technologii do Centrum BioMoBiL 25-29 / 10 / 2004 Konrad Kleszczyński Jolanta Grzenkowicz – Wydra."— Zapis prezentacji:

1 Bank Komórek Eukariotycznych Transfer Technologii do Centrum BioMoBiL / 10 / Konrad Kleszczyński Jolanta Grzenkowicz – Wydra

2 Skąd ? ADVANCELL biotechnologiczna firma wdrożeniowa wykonująca usługi dla przemysłu w oparciu o ludzkie linie komórkowe (toksykologia, onkologia, dermatologia, choroby degeneracyjne mózgu) bankowanie komórek (156 linii) tworzenie i namnażanie nowych linii dla potrzeb lokalnego środowiska naukowego i ich dystrybucja kontrola jakości otrzymywanych linii komórkowych

3 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
Sprzęt niezbędny do pracowni komórkowej: komora laminarna klasy II inkubator CO2 mikroskop świetlny z odwróconą optyką lodówka oraz zamrażarki: - 20 ÷ -30OC - 80OC system oczyszczania wody wirówki inny sprzęt

4 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
Sprzęt niezbędny do przechowywania komórek (zbiornik Dewara): zbiornik na ciekły azot (3600 ampułek o pojemności 2 ml, poj. zbiornika 116 L, parowanie 0,6 L / dobę) zbiornik magazynowy na ciekły azot (poj. zbiornika 34 L, parowanie 0,25 L / dobę)

5 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
Standardowe Procedury Operacyjne Standard Operating Procedures Zbiór szczegółowych instrukcji zapewniających jakość i spójność postępowania z komórkami. SOP obejmują: pobranie i przechowywanie próbek aparatura: obsługa, sprawdzenie działania, kalibracja odczynniki: potwierdzenie odbioru, oznakowanie, przepisy wykonania roztworu monitorowanie i rejestrowanie wszystkich czynności laboratoryjnych

6 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości

7 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
bazy danych służą do organizacji i zarządzania przechowywanymi próbkami pełen dostęp do bazy danych ma administrator, który wskazuje miejsce złożenia bądź pobrania próbki dostęp pracownika do bazy danych ogranicza się do wypełnienia formularza określonego przez SOP dostępnego w lokalnej sieci codziennie wszystkie operacje są archiwizowane

8 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości

9 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
Usługi oferowane przez Bank Linii Komórkowych Udostępnianie i sprzedaż linii komórkowych Bezpieczny depozyt, krótko- i długoterminowy Identyfikacja i kontrola jakości linii komórkowych Usuwanie zanieczyszczeń Mycoplasma z hodowli komórkowej

10 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
Przechowywanie linii komórkowych oraz ich dystrybucja Original Bank (OB) do 5 krioampułek Master Bank (MB) krioampułek Distribution Bank (DB) krioampułek 106 komórek / ml

11 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
Do podstawowych testów kontroli jakości należą: test immunocytochemiczny, test na obecność bakterii i test na obecność Mycoplasmy Metoda detekcji mykoplazmy oparta jest na amplifikacji PCR z użyciem komercyjnego zestawu Większość zanieczyszczeń hodowli komórkowych spowodowana jest przez następujące gatunki: M. arginini, M. fermentans, M. hyorhinis, M. orale, Acholeplasma laidlawii Zanieczyszczoną hodowlę traktuje się antybiotykami będącymi pochodnymi tetracykliny (minocyklina, BM-cyklina) lub ciprofloksacyną

12 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości
C+ C- M Elektroforeza w 2% żelu agarozowym produktów amplifikacji DNA C+ kontrola pozytywna C- kontrola negatywna M wzorzec masowy DNA 1-7 badane próbki hodowla zainfekowana zdrowa hodowla Mycoplasmą Barwienie wykonane wg Hoechst 33258

13 Pracownia SOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości