przeciwciała dwuswoiste andrzej rutkowski 18 maja 2004 przeciwciała dwuswoiste bsMAb na podstawie: Y. Cao, L. Lam: Advanced Drug Delivery Reviews, 55 (2003) 171-197

przeciwciała dwuswoiste czym one są?

- przecież mamy monoklony po co? - przecież mamy monoklony przeciwciała dwuswoiste ELISA, chromatografia powinowactwa, terapia, immunocytochemia, fenowypowanie, wiele innych…

komórki odpornościowe po to: molekularne kajdanki: przeciwciała dwuswoiste komórki odpornościowe toksyny, leki wektory DNA komórka docelowa enzymy szczepionki radioizotopy

toksyny, leki MAb Produkcja sprzęganie cytokina antybiotyk przeciwciała dwuswoiste toksyny, leki Produkcja MAb sprzęganie cytokina antybiotyk małe związki etc…

przeciwciała dwuswoiste toksyny, leki

enzymy A D E P T ntibody irected nzyme rodrug herapy by-stander effect przeciwciała dwuswoiste enzymy A D E P T ntibody irected nzyme rodrug herapy by-stander effect

przeciwciała dwuswoiste radioimmunoterapia

enzymy / radioizotopy MAb  sprzęganie → utrata specyficzności przeciwciała dwuswoiste enzymy / radioizotopy MAb  sprzęganie → utrata specyficzności  działanie pozamiejscowe MAb-streptawidyna + znakowana biotyna – II faza

przeciwciała dwuswoiste enzymy / radioizotopy  wielkrotna iniekcja x

x przeciwciała dwuswoiste enzymy / radioizotopy endocytoza

przeciwciała dwuswoiste radioimmunoterapia CEA % CEA

antygen śródbłonka naczyń nowotworowych x przeciwciała dwuswoiste enzymy czynnik tkankowy antygen śródbłonka naczyń nowotworowych TF TF TF TF

immunoterapia przeciwnowotworowa przeciwciała dwuswoiste immunoterapia przeciwnowotworowa + + + Fas TcR

x immunoterapia – MDX-210: III faza prób + + TcR przeciwciała dwuswoiste immunoterapia x + + – TcR MDX-210: III faza prób

immunoterapia MDX-210: III faza prób FcγRI (CD64) x przeciwciała dwuswoiste immunoterapia FcγRI (CD64) MA MO DC neutrofile MDX-210: III faza prób G-CSF, IFNg

x przeciwciała dwuswoiste terapia genowa -adenowirusy CAR integryna αv

terapia genowa -adenowirusy x specyficzny antygen przeciwciała dwuswoiste terapia genowa -adenowirusy specyficzny antygen szczury: 20x więcej w płucach, 5x mniej w tkankach

szczepionki nowotworowe przeciwciała dwuswoiste szczepionki nowotworowe CD28

szczepionki nowotworowe przeciwciała dwuswoiste szczepionki nowotworowe CD28 cytokiny MHC I

szczepionki nowotworowe przeciwciała dwuswoiste szczepionki nowotworowe % wyizolowane TL zabijały nowotwór in vitro

przeciwciała dwuswoiste produkcja strategie  zalety  wady

produkcja fuzja hybrydom  1/10 bsMAb - jak to zrobi biolog? przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biolog? fuzja hybrydom  1/10 bsMAb

produkcja sprzęganie chemiczne - jak to zrobi chemik? pepsyna przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne pepsyna DTT / 2ME

produkcja DTNB BMH p-PDM sprzęganie chemiczne - jak to zrobi chemik? przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne HOOC O2N S COOH NO2 O N DTNB - grupy tiolowe BMH - grupy aminowe Bartlett et al., Nat Biotechn 17 (1999), 181-187 S SH HS O N p-PDM - grupy tiolowe  powstają homokoniugaty http://www.molgen.mpg.de/~ag_ribo/ag_brimacombe/drc/r/pPDM.html

produkcja SPDP sprzęganie chemiczne - jak to zrobi chemik? pH > 7 przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne SPDP N O S H2N pH > 7 O S N NH DTT / 2-ME O HS NH Pierce Chemical Technical Library, Antibody Production, www.piercenet.com

produkcja DTNB BMH SPDP p-PDM sprzęganie chemiczne przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi chemik? sprzęganie chemiczne  utrata specyficzności O N HOOC O2N S COOH NO2 DTNB BMH O N N O S SPDP p-PDM

produkcja  mała stabilność  trawienie przez nukleazy przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biochemik? T G C A A C G T  mała stabilność  trawienie przez nukleazy

produkcja B  sprzęganie chemiczne Str - jak to zrobi biochemik? przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biochemik? Str B  sprzęganie chemiczne

produkcja Fab scFv - jak to zrobi biotechnolog? VH VL VH VL przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? VL VH Fab VL VH scFv

produkcja - jak to zrobi biotechnolog? jun fos scFv2 scFv1 przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? jun fos scFv2 scFv1 VL1 VH1 VL2 VH2 suwak leucynowy

produkcja - jak to zrobi biotechnolog? scFv1 scFv2 przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? scFv1 scFv2 VL1 VH1 VL2 VH2 VL2 VH1 VL1 VH2  błędne parowanie domen:

produkcja diabodies dwupciała - jak to zrobi biotechnolog? VL1 VH1 VH2 przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? diabodies dwupciała VL1 VH1 VL2 VH2 VL1 VH1 VH2 VL2 VL1 VH2 VL2 VH1

produkcja  immunogenność dwupciała - jak to zrobi biotechnolog? VL1 przeciwciała dwuswoiste produkcja - jak to zrobi biotechnolog? dwupciała VL1 VL2 VH2 VH1 VH1 VL2 VL1 VH2 VL1 VH1 VL2 VH2  immunogenność

przeciwciała dwuswoiste dziękuję za uwagę

przeciwciała dwuswoiste koniec