Rola białka pp39 mos u myszy Na podstawie artykułu: Disruption of c-mos causes parthenogenetic developement of unfertilized mouse eggs; W. H. Colledge et al., Nature 7 July 1994 Dorota Lutyk
Cel badań Wyjaśnienie roli białka pp39 mos u myszy
Co wiemy o pp39 mos ? Cytoplazmatyczna kinaza serynowo- treoninowa Protoonkogen c-mos U Xenopus: – niezbędne do wejścia oocytów w mejozę – składnik CSF (cytostatic factor) – blok w metafazie II – Po zapłodnieniu degradowany -> dokończenie II podziału mejotycznego
Co zrobiono: Wektor pMS1(neo)tk – W gen c-mos wstawiono gen oporności na neomycynę tak, że powstał kodon STOP w środku ORF
Wektor wprowadzono do embrionalnych komórek macierzystych myszy (CCE ES) CCE ES wprowadzono do blastocyst C57B1/6 Otrzymano homozygoty: x mos +/- mos -/-
Zbadano:
Wyniki Embriony c-mos -/- rozwinęły się prawiłowo Płodność mutantów: tak samo płodne jak dzikie i heterozygoty znacznie mniej płodne – średnio 2 młode w miocie (heterozygoty i dzikie – 7 młodych), częsty kanibalizm
Rozwój oocytów Oocyty izolowano z 4-tygodniowych samic po 18h od podania PMS i hCG 0 – rozpad pęcherzyka zarodkowego; 1 – wyrzucone I ciałko kierunkowe; 2 – wyrzucone I i II ciałko kierunkowe; 3 – podział cytoplazmy
Aktywacja partenogenezy Czas od podania hCG [h] Ok. 30% oocytów -/- rozwinęło się do stadium 2 komórek, niewielka część do 4 komórek
Inne obserwacje Część myszy -/- miała normalne potomstwo U mutantów (szczególnie starszych) częste cysty jajnikowe. Część z nich zawierała tkanki typowe dla potworniaka.
Wnioski C-mos u myszy nie jest niezbędny: – do życia i prawidłowego rozwoju – wejścia oocytów w mejozę – Prawidłowej spermatogenezy Pp39mos jest odpowiedzialne za blok oocytów w metafazie II Myszy -/- mogą być dobrym modelem do badań nad ludzkimi nowotworami jajników
Dziękuję za uwagę