Pobieranie prezentacji. Proszę czekać

Pobieranie prezentacji. Proszę czekać

Mikroskopia i techniki wizualizacji Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński.

Podobne prezentacje


Prezentacja na temat: "Mikroskopia i techniki wizualizacji Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński."— Zapis prezentacji:

1 Mikroskopia i techniki wizualizacji Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński

2

3

4

5

6 optyka

7

8

9 ABERRACJA SFERYCZNA Wiązki światła symetryczne względem osi optycznej i różnie od niej oddalone, po przejściu przez układ nie przecinają się w jednym punkcie

10 ABERRACJA CHROMATYCZNA Wada soczewkowych układów optycznych spowodowana zależnością współczynnika załamania światła materiału soczewek od długości fali świetlnej; przejawia się w powstawaniu na obrazie barwnych obwódek wskutek rozszczepienia światła przy załamaniu w materiale soczewki. html

11 KOMA Wiązka promieni świetlnych, wychodząca z punktu położonego poza osią optyczną, tworzy po przejściu przez układ plamkę w kształcie przecinka; ujawnia się tym bardziej, im dalej punkt leży od osi.

12 Astygmatyzm Obraz punktu położonego poza osią optyczną układu nie tworzy punktu, lecz dwie linie ogniskowe, z których jedna leży w płaszczyźnie padania, obejmującej oś soczewki i przedmiot punktowy, a druga jest do tej płaszczyzny prostopadła.

13

14

15

16 Zdolność rozdzielcza mikroskopu L = 0,61 NA NA = n sin

17

18

19 Powiększenie mikroskopu M = L f1f1 D f2f2 L – mechaniczna długość tubusa D – odległość dobrego widzenia (250 mm) f 1 – ogniskowa obiektywu f 2 – ogniskowa okularu

20 Przysłona aperturowa

21 Typy mikroskopów Mikroskop świetlny Jasnego pola Ciemnego pola Kontrastu fazowego Interferencyjny Polaryzacyjny Fluorescencyjny Elektronowy Skaningowy transmisyjny Konfokalny

22 Mikroskop jasnego i ciemnego pola

23 Mikroskop interferencyjny Kontrast Nomarskiego Analiza ilościowa suchej masy Określenie grubości skrawków Optyczne wybarwienie Plastyczny obraz

24 Mikroskop fluorescencyjny Filtr wzbudzenia Filtr absorbujący Filtr barierowy

25 Mikroskop konfokalny

26 Mikroskop elektronowy skaningowy

27 TEM

28 Metody wizualizacji Barwienie przyżyciowe Barwienie histologiczne Barwienie histochemiczne Barwienie immunohistochemiczne Barwienie fluorescencyjne Barwienie immunofluorescencyjne Barwienie radioimmunoizotopowe Barwienie enzymatyczne GFP

29 Przygotowanie materiału Preparaty parafinowe Utrwalenie tkanek – formalina Odwodnienie Przepojenie Zatopienie w parafinie Skrawanie Odparafinowanie Nawodnienie barwienie Preparaty mrożeniowe Krioprotekcja Utrwalenie w ciekłym azocie Skrawanie barwienie

30 Barwienie histologiczne Kontrastowanie struktur komórkowych Hematoksylina + eozyna fiolet krystaliczny

31 Barwienie histochemiczne Uwidocznienie określonych substancji w komórce PAS = z odczynnikiem Schiffa – wykrywa cukry

32 Barwienie immuno- Przeciwciało Przeciwciało pierwszorzędowe Przeciwciało drugorzędowe znacznik

33 Barwienie immunohistochemiczne Wykrywanie antygenów za pomocą znakowanych przeciwciał

34 Barwienie radioimmunoizotopowe Tryt Jod 125 Fosfor 32 Fosfor 33 Siarka35 Węgiel 14

35 Barwienie enzymatyczne Peroksydaza chrzanowa Alkaliczna fosfataza

36 Barwienie fluorescencyjne DiIC18 – błona komórkowa Hoechst –DNA – niebieskie DAPI Oranż akrydyny – DNA zielone; RNA pomarańczowe

37 Barwienie immunofluorescencyjne FITC Texas red Cy3 rodamina

38 GFP

39 Oświetlenie Kohlera Kondensor przesuwamy pod stolik Ustawiamy ostro widziany preparat Zamykamy przesłonę polową i aperturową Ustawiamy na środku plamkę światła Ustawiamy ostre brzegi plamki Rozszerzamy plamkę do granic pola widzenia Ustawiamy włókna żarówki centralnie


Pobierz ppt "Mikroskopia i techniki wizualizacji Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński."

Podobne prezentacje


Reklamy Google