PREPARATYWNA CHROMATOGRAFIA CIECZOWA. Otrzymywanie wzorców. na podstawie wyników prac Laboratorium Badawczo-Rozwojowego Insuliny w TZF POLFA. /dr A. Bylina, mgr inż. M. Borkowska, mgr inż. B. Grajewska-Woźniak i inni/
Chromatograf cieczowy pompa zawór dozujący kolumna detektor rejestrator
L L P
symulacja wg. Craig’a wg. idealnej chromatografii
Związek pomiędzy nanoszoną objętością próbki i chromatogramem (model idealnej chromatografii). Proszę zwrócić uwagę na - plateau odtwarzające skład roztworu wprowadzanego na kolumnę, - jego zanik, - skok stężenie pierwszej substancji na froncie chromatogramu (wynika on z prawa zachowania pędu, efekt ten może doprowadzić do wytrącenia osadu pierwszej substancji), - miejsce rozstania się substancji 1 i 2. Dla kilku substancji takich „szczególnych” punktów jest więcej.
Obok uwarunkowań wynikających z teorii preparatywnej chromatografii cieczowej, posiadanego sprzętu, należy zwrócić uwagę na cele postawionego zadania. W dalszym ciągu omówione zostaną niektóre elementy zadania: „proszę dostarczyć dla potrzeb laboratoriów analitycznych, wzorce substancji będących zanieczyszczeniami towarzyszącymi głównemu produktowi”. W każdym sformułowaniu zadania należy: w prowadzonych doświadczeniach, w wykonywanych symulacjach, powadzić rachunek kosztów procesu rozdziału.
Dwuwodzian erytromycyny A procesy technologiczne Proces otrzymywania EMC A. Sterptomyces erythreus Dwuwodzian erytromycyny A EMC A Przyczyny: EMC B EMC C EMC D EMC E EMC F N-demetylo EMC A enoloeter EMC A enoloeter pseudo EMC A (EMC X) anhydro EMC A (EMC P) Genetyka Odżywianie Oddychanie Temperatura pH Wyodrębnianie Oczyszczanie fermentor procesy technologiczne odpad
Wzory niektórych erytromycyn
Wyniki z pierwszych rozdziałów. Przykład chromatogramu i identyfikacja poprzez TLC. Wyniki z pierwszych rozdziałów.
30g rodanek EMC A (8% E) 4g(20%E) 10g (20% E) 0.46g (80% E) Szara codzienność 30g rodanek EMC A (8% E) 4g(20%E) 10g (20% E) 0.46g (80% E) 6g (80% E) 2g (>95% E)
EMC B
Symulacja komputerowa k1 = 1.8 m1 = 5.9% k2 = 2.1 m2 = 88.2% k3 = 2.4 m3 = 5.9%